Salamat sa pagbisita sa Nature.com. Ang bersyon ng browser na iyong ginagamit ay may limitadong suporta sa CSS. Para sa pinakamahusay na mga resulta, inirerekumenda namin na gumamit ka ng isang mas bagong bersyon ng iyong browser (o huwag paganahin ang mode ng pagiging tugma sa Internet Explorer). Samantala, upang matiyak ang patuloy na suporta, ipinapakita namin ang site nang walang estilo o JavaScript.
Ang paglaki ng mikrobyo sa mga sugat ay madalas na nagpapakita ng sarili bilang mga biofilms, na nakakasagabal sa pagpapagaling at mahirap puksain. Ang mga bagong damit na pilak ay nagsasabing labanan ang mga impeksyon sa sugat, ngunit ang kanilang pagiging epektibo ng antibiofilm at impeksyon-independiyenteng mga epekto ng pagpapagaling ay karaniwang hindi kilala. Gamit ang vitro at sa mga vivo biofilm na mga modelo ng Staphylococcus aureus at Pseudomonas aeruginosa, iniulat namin ang pagiging epektibo ng mga dressings ng AG1+ ion; Ang AG1+ dressings na naglalaman ng ethylenediaminetetraacetic acid at benzethonium chloride (AG1+/EDTA/BC), at mga damit na naglalaman ng pilak na nitrate (AG oxysalts). , na gumagawa ng Ag1+, Ag2+ at Ag3+ ion upang labanan ang sugat na biofilm at ang epekto nito sa pagpapagaling. Ang AG1+ dressings ay may kaunting epekto sa sugat na biofilm sa vitro at sa mga daga (C57BL/6J). Sa kaibahan, ang mga oxygenated AG salts at AG1+/EDTA/BC dressings ay makabuluhang nabawasan ang bilang ng mga mabubuhay na bakterya sa biofilms sa vitro at nagpakita ng isang makabuluhang pagbawas sa mga sangkap ng bakterya at EPS sa mga biofilms ng sugat ng mouse. Ang mga damit na ito ay may iba't ibang mga epekto sa pagpapagaling ng mga biofilm na nahawaan at hindi nahawahan na mga sugat na nahawaan, na may oxygenated na mga damit na asin na may mas kapaki-pakinabang na epekto sa reepithelialization, laki ng sugat, at pamamaga kumpara sa mga kontrol sa paggamot at iba pang mga damit na pang-pilak. Ang iba't ibang mga katangian ng physicochemical ng mga pilak na damit ay maaaring magkaroon ng iba't ibang mga epekto sa sugat na biofilm at pagpapagaling, at dapat itong isaalang-alang kapag pumipili ng damit para sa paggamot ng mga sugat na nahawaan ng biofilm.
Ang mga talamak na sugat ay tinukoy bilang "mga sugat na hindi mabibigo sa pag -unlad sa pamamagitan ng mga normal na yugto ng pagpapagaling sa isang maayos at napapanahong paraan" 1. Ang mga talamak na sugat ay lumikha ng isang sikolohikal, panlipunan at pang -ekonomiyang pasanin para sa mga pasyente at sistema ng pangangalaga sa kalusugan. Ang taunang paggasta ng NHS sa pagpapagamot ng mga sugat at mga nauugnay na comorbidities ay tinatayang £ 8.3 bilyon noong 2017-1818. Ang mga talamak na sugat ay kasalukuyang isang pagpindot na problema sa Estados Unidos, na tinantya ng Medicare ang taunang gastos sa paggamot sa mga pasyente na may mga sugat sa $ 28.1- $ 96.8 bilyon3.
Ang impeksyon ay isang pangunahing kadahilanan na pumipigil sa pagpapagaling ng sugat. Ang mga impeksyon ay madalas na nagpapakita bilang mga biofilms, na naroroon sa 78% ng mga hindi nakapagpapagaling na talamak na sugat. Ang mga biofilms ay bumubuo kapag ang mga microorganism ay hindi maibabalik na nakakabit sa mga ibabaw, tulad ng mga sugat na ibabaw, at maaaring magkasama upang mabuo ang extracellular polymer (EPS) -producing na mga komunidad. Ang biofilm ng sugat ay nauugnay sa isang pagtaas ng nagpapasiklab na tugon na humahantong sa pinsala sa tisyu, na maaaring maantala o maiwasan ang pagpapagaling4. Ang pagtaas ng pinsala sa tisyu ay maaaring dahil sa bahagi sa pagtaas ng aktibidad ng matrix metalloproteinases, collagenase, elastase at reaktibo na species ng oxygen5. Bukod dito, ang mga nagpapaalab na mga cell at biofilms ay ang kanilang mga sarili na mataas na mga mamimili ng oxygen at samakatuwid ay maaaring maging sanhi ng lokal na hypoxia ng tisyu, pag -ubos ng mga cell ng mahalagang oxygen na kinakailangan para sa epektibong pag -aayos ng tisyu6.
Ang mga mature biofilms ay lubos na lumalaban sa mga ahente ng antimicrobial, na nangangailangan ng mga agresibong diskarte upang makontrol ang mga impeksyon sa biofilm, tulad ng mekanikal na paggamot na sinusundan ng epektibong paggamot sa antimicrobial. Dahil ang mga biofilms ay maaaring mabilis na magbagong muli, ang mga epektibong antimicrobial ay maaaring mabawasan ang panganib ng muling pagbuo pagkatapos ng kirurhiko na labi7.
Ang pilak ay lalong ginagamit sa mga antimicrobial dressings at madalas na ginagamit bilang isang first-line na paggamot para sa talamak na mga nahawaang sugat. Maraming mga magagamit na komersyal na pilak na damit, bawat isa ay naglalaman ng ibang komposisyon ng pilak, konsentrasyon, at base matrix. Ang mga pagsulong sa pilak na mga armband ay humantong sa pagbuo ng mga bagong pilak na armband. Ang metal na form ng pilak (AG0) ay hindi gumagalaw; Upang makamit ang pagiging epektibo ng antimicrobial, dapat itong mawalan ng isang elektron upang mabuo ang ionic silver (AG1+). Ang mga tradisyunal na pilak na dressings ay naglalaman ng mga compound ng pilak o metal na pilak na, kapag nakalantad sa likido, mabulok upang mabuo ang mga Ag1+ ion. Ang mga Ag1+ ion na ito ay gumanti sa cell ng bakterya, pag -alis ng mga electron mula sa mga sangkap na istruktura o kritikal na proseso na kinakailangan para mabuhay. Ang patentadong teknolohiya ay humantong sa pag -unlad ng isang bagong tambalang pilak, Ag oxysalts (Silver Nitrate, AG7NO11), na kasama sa mga damit na pang -sugat. Hindi tulad ng tradisyonal na pilak, ang agnas ng mga asing-gamot na naglalaman ng oxygen ay gumagawa ng mga estado ng pilak na may mas mataas na valence (Ag1+, Ag2+at Ag3+). Sa mga pag -aaral ng vitro ay nagpakita na ang mababang konsentrasyon ng mga oxygenated na pilak na asing -gamot ay mas epektibo kaysa sa solong ion pilak (AG1+) laban sa mga bakterya ng pathogenic tulad ng Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus at Escherichia coli8,9. Ang isa pang bagong uri ng sarsa ng pilak ay may kasamang karagdagang sangkap, lalo na ang ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) at benzethonium chloride (BC), na iniulat na target ang biofilm EPS at sa gayon ay madaragdagan ang pagtagos ng pilak sa biofilm. Ang mga bagong teknolohiyang pilak ay nag -aalok ng mga bagong paraan upang ma -target ang mga biofilms ng sugat. Gayunpaman, ang epekto ng mga antimicrobial na ito sa kapaligiran ng sugat at ang independiyenteng pagpapagaling ay mahalaga upang matiyak na hindi sila lumikha ng isang hindi kanais-nais na kapaligiran ng sugat o pagkaantala sa pagpapagaling. Ang mga alalahanin tungkol sa vitro pilak na cytotoxicity ay naiulat na may maraming mga pilak na dressings10,11. Gayunpaman, sa vitro cytotoxicity ay hindi pa isinalin sa vivo toxicity, at maraming mga AG1+ dressings ang nagpakita ng isang mahusay na profile sa kaligtasan12.
Dito, sinisiyasat namin ang pagiging epektibo ng mga dressing ng carboxymethylcellulose na naglalaman ng mga nobelang pilak na pormulasyon laban sa sugat na biofilm sa vitro at sa vivo. Bilang karagdagan, ang mga epekto ng mga damit na ito sa mga tugon ng immune at pagpapagaling na independiyenteng impeksyon ay nasuri.
Ang lahat ng mga damit na ginamit ay magagamit sa komersyo. Ang 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3m, Knutsford, UK) ay isang non-antimicrobial 100% carboxymethylcellulose (CMC) gel fiber dressing na ginamit bilang control dressing sa pag-aaral na ito. Tatlong antimicrobial CMC pilak na damit ang nasuri, lalo na ang 3M Kerracel AG dressing (3m, Knutsford, UK), na naglalaman ng 1.7 wt%. oxygenated silver salt (AG7NO11) sa mas mataas na valence pilak na mga ions (Ag1+, Ag2+at Ag3+). Sa panahon ng agnas ng AG7NO11, ang AG1+, AG2+ at AG3+ ion ay nabuo sa isang ratio ng 1: 2: 4. Aquacel AG Extra Dressing na naglalaman ng 1.2% Silver Chloride (AG1+) (ConvateC, Deeside, UK) 13 at Aquacel AG+Extra Dressing na naglalaman ng 1.2% Silver Chloride (AG1+), EDTA at Benzethonium Chloride (Convatec, Deeside, UK) 14.
Ang mga strain na ginamit sa pag -aaral na ito ay ang Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) at Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Ang bakterya ay lumaki nang magdamag sa sabaw ng Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). Ang magdamag na kultura ay pagkatapos ay natunaw 1: 100 sa Mueller-Hinton na sabaw at 200 µl na naka-plate sa sterile 0.2 µm Whatman Cyclopore Membranes (Whatman Plc, Maidstone, UK) papunta sa Mueller-Hinton Agar Plates (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Great Britain ). ) Pagbuo ng kolonyal na biofilm sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras. Ang mga kolonyal na biofilms na ito ay nasubok para sa pag -urong ng logarithmic.
Gupitin ang damit sa 3 cm2 square piraso at pre-moisten na may sterile deionized water. Ilagay ang bendahe sa ibabaw ng biofilm ng kolonya sa agar plate. Ang bawat 24 ha ng biofilm ay tinanggal, at ang mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm (CFU/mL) ay nasukat sa pamamagitan ng serial pagbabanto (10−1 hanggang 10−7) sa pang-araw-anggulo na neutralisasyon na sabaw (Merck-millipore). Matapos ang 24 na oras ng pagpapapisa ng itlog sa 37 ° C, ang mga karaniwang bilang ng plate ay isinagawa sa Mueller-Hinton agar plate. Ang bawat paggamot at oras ng oras ay isinagawa sa triplicate, at ang mga bilang ng plate ay paulit -ulit para sa bawat pagbabanto.
Ang balat ng tiyan ng baboy ay nakuha mula sa mga babaeng malalaking puting baboy sa loob ng 15 minuto ng pagpatay alinsunod sa mga pamantayan sa pag -export ng European Union. Ang balat ay naahit at nalinis ng mga wipe ng alkohol, pagkatapos ay nagyelo sa -80 ° C sa loob ng 24 na oras upang mapaglaya ang balat. Matapos ang pag -thawing, ang 1 cm2 na mga piraso ng balat ay hugasan ng tatlong beses sa PBS, 0.6% sodium hypochlorite, at 70% ethanol sa loob ng 20 minuto bawat oras. Bago alisin ang epidermis, alisin ang anumang natitirang ethanol sa pamamagitan ng paghuhugas ng 3 beses sa sterile PBS. Ang balat ay naka-kultura sa isang 6-well plate na may isang 0.45-μm-makapal na naylon membrane (Merck-millipore) sa itaas at 3 sumisipsip na pad (Merck-millipore) na naglalaman ng 3 ml fetal bovine serum (Sigma) na pupunan ng 10% na binago ng Dulbecco's na binago Eagle. Katamtaman (Binagong Eagle Medium ng Dulbecco - Aldrich Ltd.).
Ang mga kolonyal na biofilms ay lumaki tulad ng inilarawan para sa mga pag -aaral ng pagkakalantad sa biofilm. Matapos ang pag -kultura ng biofilm sa lamad sa loob ng 72 oras, ang biofilm ay inilapat sa balat ng balat gamit ang isang sterile inoculation loop at tinanggal ang lamad. Ang biofilm ay pagkatapos ay natupok sa dermis ng baboy para sa isang karagdagang 24 na oras sa 37 ° C upang payagan ang biofilm na tumanda at sumunod sa balat ng baboy. Matapos ang biofilm ay matured at nakalakip, isang 1.5 cm2 dressing, pre-moistened na may sterile distilled water, ay inilapat nang direkta sa balat ng balat at natupok sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras. Ang mga mabubuhay na bakterya ay na -visualize sa pamamagitan ng paglamlam sa pamamagitan ng pantay na pag -aaplay ng propoblue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) sa apical na ibabaw ng bawat pagsabog at pag -incubating nito sa loob ng 5 minuto. Gumamit ng Leica DFC425 digital camera upang agad na makuha ang mga imahe sa mikroskopyo ng Leica MZ8. Ang mga lugar na kulay rosas ay nai-rate gamit ang Image Pro Software Bersyon 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (Mediacy.com)). Ang pag -scan ng mikroskopya ng elektron ay isinagawa tulad ng inilarawan sa ibaba.
Ang bakterya na lumago magdamag ay natunaw 1: 100 sa sabaw ng Mueller-Hinton. 200 μl ng kultura ay naidagdag sa sterile 0.2 μm Whatman Cyclopore Membrane (Whatman, Maidstone, UK) at plated sa Mueller-Hinton agar. Ang mga plate ng biofilm ay natupok sa 37 ° C sa loob ng 72 oras upang payagan ang pagbuo ng mature biofilm.
Matapos ang 3 araw ng pagkahinog ng biofilm, isang 3 cm2 square bendage ay inilagay nang direkta sa biofilm at natupok sa 37 ° C sa loob ng 24 na oras. Matapos alisin ang bendahe mula sa ibabaw ng biofilm, 1 ml ng propoblue cell viability reagent (Invitrogen, Waltham, MA) ay idinagdag sa ibabaw ng bawat biofilm sa loob ng 20 segundo. Ang mga ibabaw ay natuyo bago naitala ang mga pagbabago sa kulay gamit ang isang Nikon D2300 digital camera (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Maghanda ng mga magdamag na kultura sa Mueller-Hinton agar, ilipat ang mga indibidwal na kolonya sa 10 ml Mueller-Hinton na sabaw at mapapawi sa isang shaker sa 37 ° C (100 rpm). Matapos ang magdamag na pagpapapisa ng itlog, ang kultura ay natunaw 1: 100 sa sabaw ng Mueller-Hinton at 300 µL ay nakita sa 0.2 µm Circular Whatman Cyclopore Membrane (Whatman International, Maidstone, UK) sa Mueller-Hinton Agar at napapawi sa 37 ° C sa loob ng 72 oras . . Ang mature biofilm ay inilapat sa sugat tulad ng inilarawan sa ibaba.
Ang lahat ng pakikipagtulungan sa mga hayop ay isinasagawa sa University of Manchester sa ilalim ng isang lisensya ng proyekto na naaprubahan ng Office of Animal Welfare and Ethical Review (P8721BD27) at alinsunod sa mga alituntunin na inilathala ng Home Office sa ilalim ng binagong ASPA. Ang lahat ng mga may -akda ay sumunod sa mga alituntunin sa pagdating. Walong-linggong-gulang na C57BL/6J mice (Envigo, Oxon, UK) ay ginamit para sa lahat sa mga pag-aaral ng vivo. Ang mga daga ay sinuri ng isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) at ang kanilang mga dorsal na ibabaw ay na -ahit at nalinis. Ang bawat mouse ay binigyan ng isang 2 × 6 mm na pansamantalang sugat gamit ang isang stiefel biopsy punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Para sa mga sugat na nahawaan ng biofilm, mag-apply ng 72-oras na kolonyal na biofilm na lumago sa lamad tulad ng inilarawan sa itaas sa dermal layer ng sugat gamit ang isang sterile inoculation loop kaagad pagkatapos ng pinsala at itapon ang lamad. Ang isang parisukat na sentimetro ng pagbibihis ay pre-moistened na may sterile water upang mapanatili ang isang basa-basa na kapaligiran ng sugat. Ang mga damit ay inilapat nang direkta sa bawat sugat at natatakpan ng 3M Tegaderm film (3M, Bracknell, UK) at Mastisol Liquid Adhesive (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) na inilapat sa paligid ng mga gilid upang magbigay ng karagdagang pagdirikit. Ang Buprenorphine (Animalcare, York, UK) ay pinamamahalaan sa isang konsentrasyon ng 0.1 mg/kg bilang isang analgesic. Cull Mice Tatlong araw pagkatapos ng pinsala gamit ang pamamaraan ng Iskedyul 1 at alisin, maghati, at mag -imbak ng lugar ng sugat kung kinakailangan.
Ang Hematoxylin (Thermofisher Scientific) at Eosin (Thermofisher Scientific) na paglamlam ay isinagawa ayon sa protocol ng tagagawa. Ang lugar ng sugat at reepithelialization ay nai -rate gamit ang Image Pro software bersyon 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Ang mga seksyon ng tisyu ay na -dewaxed sa xylene (Thermofisher Scientific, Loughborough, UK), na -rehydrated na may 100-50% graded ethanol, at maikling nalubog sa deionized na tubig (Thermofisher Scientific). Ang Immunohistochemistry ay isinagawa gamit ang Vectastain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ayon sa protocol ng tagagawa. Pangunahing mga antibodies sa neutrophils NIMP-R14 (ThermoFisher Scientific) at Macrophages MS CD107B Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) ay natunaw 1: 100 sa pagharang ng solusyon at idinagdag sa cut surface, na sinusundan ng 2 antibodies anti-, vectastain ABC at Vector Nova Red Peroxidase (HRP) Substrate Kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) at counterstained na may hematoxylin. Ang mga imahe ay nakuha gamit ang isang mikroskopyo ng Olympus BX43 at isang Olympus DP73 digital camera (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
Ang mga sample ng balat ay naayos sa 2.5% glutaraldehyde at 4% formaldehyde sa 0.1 m hepes (pH 7.4) sa loob ng 24 na oras sa 4 ° C. Ang mga sample ay na-dehydrated gamit ang graded ethanol at pinatuyong sa CO2 gamit ang isang korum K850 kritikal na point dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) at sputter na pinahiran ng haluang metal na ginto-talladium gamit ang isang quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge system. Ang mga ispesimen ay ginagampanan gamit ang isang FEI quanta 250 na pag -scan ng elektron mikroskopyo (ThermoFisher Scientific) upang mailarawan ang gitnang punto ng sugat.
Ang Toto-1 iodide (2 μM) ay inilapat sa nabigla na ibabaw ng sugat ng mouse at natupok para sa 5 min sa 37 ° C (Thermofisher Scientific) at ginagamot sa SYTO-60 (10 μM) sa 37 ° C (Thermofisher Scientific). 15-minuto na mga imahe ng Z-Stack ay nilikha gamit ang isang Leica TCS SP8.
Ang data ng biological at teknikal na pagtitiklop ay naka -tabulate at nasuri gamit ang GraphPad Prism V9 software (GraphPad Software, La Jolla, CA). Ang one-way na pagsusuri ng pagkakaiba-iba na may maraming mga paghahambing gamit ang post hoc test ng Dunnett ay ginamit upang subukan para sa mga pagkakaiba sa pagitan ng bawat paggamot at ang di-antimicrobial control dressing. Ang isang halaga ng P <0.05 ay itinuturing na makabuluhan.
Ang pagiging epektibo ng pilak na gel fibrous dressings ay unang nasuri laban sa mga kolonya ng biofilm ng Staphylococcus aureus at Pseudomonas aeruginosa sa vitro. Ang mga pilak na damit ay naglalaman ng iba't ibang mga pormula ng pilak: Ang tradisyonal na mga damit na pilak ay gumagawa ng Ag1+ ion; Ang mga damit na pilak, na maaaring makagawa ng mga ion ng Ag1+ pagkatapos ng pagdaragdag ng EDTA/BC, ay maaaring sirain ang biofilm matrix at ilantad ang bakterya sa pilak sa ilalim ng antibacterial na epekto ng pilak. IONS15 at mga damit na naglalaman ng mga oxygenated Ag salt na gumagawa ng Ag1+, Ag2+ at Ag3+ ion. Ang pagiging epektibo nito ay inihambing sa isang di-antimicrobial control dressing na gawa sa mga gelled fibers. Ang natitirang mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm ay nasuri tuwing 24 na oras para sa 8 araw (Larawan 1). Sa araw na 5, ang biofilm ay na -reinoculated na may 3.85 × 105s. Staphylococcus aureus o 1.22 × 105p. aeruginosa upang masuri ang pagbawi ng biofilm. Kung ikukumpara sa mga di-antimicrobial control dressings, ang AG1+ dressings ay may kaunting epekto sa kakayahang umangkop sa bakterya sa Staphylococcus aureus at Pseudomonas aeruginosa biofilms sa loob ng 5 araw. Sa kaibahan, ang mga damit na naglalaman ng oxygenated AG at AG1 + + EDTA/BC salts ay epektibo sa pagpatay sa mga bakterya sa loob ng biofilm sa loob ng 5 araw. Matapos ang paulit -ulit na inoculation na may bakterya ng planktonic sa araw na 5, walang pagpapanumbalik ng biofilm na sinusunod (Larawan 1).
Ang dami ng mabubuhay na bakterya sa Staphylococcus aureus at Pseudomonas aeruginosa biofilms pagkatapos ng paggamot na may mga damit na pilak. Ang mga kolonya ng Biofilm ng Staphylococcus aureus at Pseudomonas aeruginosa ay ginagamot ng mga pilak na damit o hindi antimicrobial control dressings, at ang bilang ng mga mabubuhay na bakterya na natitira ay natutukoy tuwing 24 na oras. Matapos ang 5 araw, ang biofilm ay na -reinoculated na may 3.85 × 105s. Staphylococcus aureus o 1.22 × 105p. Ang mga kolonya ng bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa ay nabuo nang paisa -isa upang masuri ang pagbawi ng biofilm. Ang mga graph ay nagpapakita ng ibig sabihin +/- standard error.
Upang mailarawan ang epekto ng mga damit na pilak sa kakayahang umangkop sa biofilm, ang mga damit ay inilapat sa mga mature na biofilms na lumago sa porcine skin ex vivo. Matapos ang 24 na oras, ang dressing ay tinanggal at ang biofilm ay marumi na may isang asul na reaktibo na pangulay, na kung saan ay na -metabolize ng buhay na bakterya sa isang kulay rosas na kulay. Ang mga biofilms na ginagamot sa mga control dressings ay kulay rosas, na nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm (Larawan 2A). Sa kaibahan, ang biofilm na ginagamot sa AG oxysols dressing ay pangunahing asul, na nagpapahiwatig na ang natitirang bakterya sa ibabaw ng balat ng baboy ay hindi mabibigat na bakterya (Larawan 2B). Ang halo-halong asul at kulay-rosas na kulay ay sinusunod sa mga biofilms na ginagamot sa AG1+ -containing dressings, na nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mabubuhay at hindi mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm (Larawan 2C), samantalang ang mga damit na EDTA/BC na naglalaman ng AG1+ ay nakararami na asul na may ilang mga rosas na lugar. nagpapahiwatig ng mga lugar na hindi apektado ng pilak na sarsa (Larawan 2D). Ang dami ng mga aktibong (rosas) at hindi aktibo (asul) na mga lugar ay nagpakita na ang control patch ay 75% aktibo (Larawan 2E). Ang mga damit na AG1 + + EDTA/BC ay gumanap nang katulad sa oxygenated AG salt dressings, na may mga rate ng kaligtasan ng 13% at 14%, ayon sa pagkakabanggit. Ang AG1+ dressing ay nabawasan din ang kakayahang umangkop sa bakterya ng 21%. Ang mga biofilms na ito ay pagkatapos ay sinusunod gamit ang pag -scan ng mikroskopya ng elektron (SEM). Matapos ang paggamot sa control dressing at ang AG1+ dressing, isang layer ng Pseudomonas aeruginosa ay na -obserbahan na sumasakop sa balat ng porcine (Larawan 2F, H), samantalang pagkatapos ng paggamot sa AG1+ dressing, ilang mga cell ng bakterya ang natagpuan at kakaunti ang mga cell ng bakterya ay natagpuan sa ilalim. Ang mga fibers ng collagen ay maaaring isaalang -alang bilang istraktura ng tisyu ng balat ng porcine (Larawan 2G). Matapos ang paggamot sa AG1 + + EDTA/BC dressing, ang mga bakterya na plato at pinagbabatayan na mga plato ng fiber ng collagen ay nakikita (Larawan 2I).
Visualization ng Pseudomonas aeruginosa biofilm pagkatapos ng paggamot sa pilak. . Ang mga live na bakterya ay kulay rosas, hindi mabubuhay na bakterya at balat ng baboy ay asul. . SEM scale bar = 5 µm. (J -M) Ang mga kolonyal na biofilms ay lumago sa mga filter at stain na may pretoblue reactive dye pagkatapos ng 24 h ng pagpapapisa ng mga damit na pilak.
Upang matukoy kung ang malapit na pakikipag -ugnay sa pagitan ng mga dressings at ang mga biofilms ay nakakaapekto sa pagiging epektibo ng mga damit, ang mga kolonyal na biofilms na nakalagay sa isang patag na ibabaw ay ginagamot sa mga damit sa loob ng 24 na oras at pagkatapos ay marumi na may mga reaktibo na tina. Ang hindi nabagong biofilm ay madilim na kulay -rosas na kulay (Larawan 2J). Kabaligtaran sa mga biofilms na ginagamot sa mga damit na naglalaman ng mga oxygenated Ag salts (Larawan 2K), ang mga biofilms na ginagamot sa mga damit na naglalaman ng Ag1+ o Ag1++ EDTA/BC ay nagpakita ng mga banda ng rosas na paglamlam (Larawan 2L, M). Ang kulay rosas na kulay na ito ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mabubuhay na bakterya at nauugnay sa lugar ng suture sa loob ng sarsa. Ang mga lugar na ito ng sewn-in ay lumikha ng mga patay na puwang na nagpapahintulot sa bakterya sa loob ng biofilm na mabuhay.
Upang masuri ang pagiging epektibo ng mga pilak na damit sa vivo, ang buong-kapal ay nabigla na mga sugat ng mga daga na nahawahan ng mature S. aureus at P. aeruginosa biofilms ay ginagamot ng mga nonantimicrobial control dressings o pilak na damit. Matapos ang 3 araw na paggamot, ang pagsusuri ng imahe ng macroscopic ay nagpakita ng mas maliit na laki ng sugat kapag ginagamot sa mga oxygenated na damit na asin kumpara sa mga di-antimicrobial control dressings at iba pang mga pilak na damit (Larawan 3A-H). Upang kumpirmahin ang mga obserbasyong ito, ang mga sugat ay na-ani at ang lugar ng sugat at reepithelialization ay nai-rate sa hematoxylin at mga seksyon na may tisyu na tisyu gamit ang Image Pro software bersyon 10 (Larawan 3i-L).
Ang epekto ng mga pilak na damit sa ibabaw ng sugat at muling pagsabog ng mga sugat na nahawahan ng mga biofilms. . Pagbibihis. Mga imahe ng Representative macroscopic. Mga sugat ng mga daga na may AG1 + + EDTA/BC dressing. (IL) Ang kinatawan ng Pseudomonas aeruginosa impeksyon, mga seksyon ng histological na may mantsa na may hematoxylin at eosin, na ginamit upang mabuo ang lugar ng sugat at epithelial regeneration. Ang dami ng lugar ng sugat (M, O) at porsyento na reepithelialization (N, P) ng mga sugat na nahawahan ng Pseudomonas aeruginosa (M, N) at Staphylococcus aureus (O, P) biofilms (bawat grupo ng paggamot n = 12). Ang mga graph ay nagpapakita ng ibig sabihin +/- standard error. * nangangahulugang p = <0.05 ** ay nangangahulugang p = <0.01; Macroscopic scale = 2.5 mm, histological scale = 500 µm.
Ang pagsukat ng lugar ng sugat sa mga sugat na nahawahan ng pseudomonas aeruginosa biofilm (Larawan 3M) ay nagpakita na ang mga sugat na ginagamot sa Ag oxysalts ay may average na laki ng sugat na 2.5 mm2, habang ang di-antimicrobial control dressing ay may average na laki ng sugat na 3.1 mm2, na hindi totoo. naabot ang istatistikong kabuluhan (Larawan 3M). p = 0.423). Ang mga sugat na ginagamot sa Ag1+ o AG1++ EDTA/BC ay hindi nagpakita ng pagbawas sa lugar ng sugat (3.1 mm2 at 3.6 mm2, ayon sa pagkakabanggit). Ang paggamot na may oxygenated AG salt dressing ay nagtaguyod ng muling epithelialization sa isang mas malawak na lawak kaysa sa di-antimicrobial control dressing (34% at 15%, ayon sa pagkakabanggit; P = 0.029) at AG1+ o AG1++ EDTA/BC (10% at 11%) ( Larawan 3n). . , ayon sa pagkakabanggit).
Ang mga katulad na uso sa lugar ng sugat at epithelial regeneration ay sinusunod sa mga sugat na nahawahan ng S. aureus biofilms (Larawan 3O). Ang mga damit na naglalaman ng oxygenated na mga asing-gamot na pilak ay nabawasan ang lugar ng sugat (2.0 mm2) ng 23% kumpara sa control non-antimicrobial dressing (2.6 mm2), bagaman ang pagbawas na ito ay hindi makabuluhan (p = 0.304) (Fig. 3o). Bilang karagdagan, ang lugar ng sugat sa pangkat ng paggamot ng AG1+ ay bahagyang nabawasan (2.4 mm2), habang ang sugat na ginagamot sa AG1++ EDTA/BC dressing ay hindi binawasan ang lugar ng sugat (2.9 mm2). Ang mga asing-gamot ng Oxygen ng AG ay nagtaguyod din ng muling pagsabog ng mga sugat na nahawahan ng S. aureus biofilm (31%) sa mas malawak na lawak kaysa sa mga ginagamot sa mga di-antimicrobial control dressings (12%, p = 0.003) (Larawan 3P). Ang AG1+ Dressing (16%, p = 0.903) at Ag+ 1+ EDTA/BC dressing (14%, p = 0.965) ay nagpakita ng mga antas ng epithelial regeneration na katulad ng kontrol.
Upang mailarawan ang epekto ng mga damit na pilak sa biofilm matrix, ang Toto 1 at Syto 60 iodide staining ay isinagawa (Fig. 4). Ang Toto 1 iodide ay isang cell-impermeable dye na maaaring magamit upang tumpak na mailarawan ang mga extracellular nucleic acid, na sagana sa EPS ng mga biofilms. Ang Syto 60 ay isang cell permeable dye na ginamit bilang isang counterstain16. Ang mga obserbasyon ng Toto 1 at Syto 60 iodide sa mga sugat na inoculated na may mga biofilms ng Pseudomonas aeruginosa (Larawan 4A-D) at Staphylococcus aureus (Larawan 4I-L) ay nagpakita na pagkatapos ng 3 araw ng paggamot sa damit, ang EPS sa biofilm ay makabuluhang nabawasan. Naglalaman ng mga oxygenated salts AG at AG1 + + EDTA/BC. Ang mga damit na AG1+ na walang karagdagang mga sangkap na antibiofilm ay makabuluhang nabawasan ang cell-free DNA sa mga sugat na inoculated na may pseudomonas aeruginosa ngunit hindi gaanong epektibo sa mga sugat na inoculated na may Staphylococcus aureus.
Sa vivo imaging ng sugat biofilm pagkatapos ng 3 araw ng paggamot na may kontrol o pilak na damit. Ang mga imahe ng confocal ng Pseudomonas aeruginosa (A -D) at Staphylococcus aureus (I -L) na may stain na may Toto 1 (berde) upang mailarawan ang mga extracellular nucleic acid, isang sangkap ng extracellular biofilm polymers. Upang mantsang intracellular nucleic acid, gumamit ng syto 60 (pula). acid. P. Ang pag -scan ng elektron mikroskopya ng mga sugat na nahawahan ng Pseudomonas aeruginosa (E -H) at Staphylococcus aureus (M -P) biofilms pagkatapos ng 3 araw ng paggamot na may kontrol at pilak na damit. SEM scale bar = 5 µm. Confocal imaging scale bar = 50 µm.
Ang pag-scan ng mikroskopya ng elektron ay nagpakita na ang mga daga na inoculated na may mga kolonya ng biofilm ng Pseudomonas aeruginosa (Larawan 4E-H) at Staphylococcus aureus (Larawan 4M-P) ay may mas kaunting mga bakterya sa kanilang mga sugat pagkatapos ng 3 araw ng paggamot sa lahat ng mga damit na pilak.
Upang masuri ang epekto ng mga damit na pilak sa pamamaga ng sugat sa mga daga na nahawaan ng biofilm, ang mga seksyon ng mga sugat na nahawaan ng biofilm na ginagamot ng kontrol o pilak na damit sa loob ng 3 araw ay mga immunohistochemically stain gamit ang mga antibodies na tiyak para sa mga neutrophil at macrophage. Ang dami ng pagpapasiya ng mga neutrophil at macrophage sa loob. Granulation tissue. Larawan 5). Ang lahat ng mga pilak na damit ay nabawasan ang bilang ng mga neutrophil at macrophage sa mga sugat na nahawahan ng Pseudomonas aeruginosa kumpara sa mga di-antimicrobial control dressings pagkatapos ng tatlong araw na paggamot. Gayunpaman, ang paggamot na may oxygenated na pilak na sarsa ng asin ay nagresulta sa isang mas malaking pagbawas sa mga neutrophil (p = <0.0001) at macrophage (p = <0.0001) kumpara sa iba pang mga damit na pilak na nasubok (Larawan 5i, j). Bagaman ang AG1++ EDTA/BC ay may higit na epekto sa biofilm ng sugat, binawasan nito ang mga antas ng neutrophil at macrophage sa mas mababang sukat kaysa sa pagbibihis ng AG1+. Ang mga katamtamang sugat na nahawahan ng S. aureus biofilm ay na -obserbahan din pagkatapos magbihis ng Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) at Ag1 ++ EDTA/BC (p = 0.0043) na mga oxisol kumpara sa kontrol. Ang mga katulad na uso ay sinusunod para sa neutropenia. bendahe (Fig. 5K). Gayunpaman, tanging ang oxygenated AG salt dressing ay nagpakita ng isang makabuluhang pagbawas sa bilang ng mga macrophage sa butil ng butil kumpara sa kontrol sa mga sugat na nahawahan ng S. aureus biofilms (P = 0.0339) (Larawan 5L).
Ang mga neutrophil at macrophage ay nai-rate sa mga sugat na nahawahan ng Pseudomonas aeruginosa at Staphylococcus aureus biofilms pagkatapos ng 3 araw ng paggamot na may kontrol na hindi antimicrobial o pilak na damit. Ang mga Neutrophils (AD) at macrophage (EH) ay nasukat sa mga seksyon ng tisyu na may mga seksyon na may mga antibodies na tiyak para sa mga neutrophil o macrophage. Ang dami ng mga neutrophil (I at K) at macrophage (J at L) sa mga sugat na nahawahan ng Pseudomonas aeruginosa (I at J) at Staphylococcus aureus (K&L) biofilms. N = 12 bawat pangkat. Ang mga graph ay nagpapakita ng ibig sabihin ng +/- standard error, ang mga halaga ng kabuluhan kumpara sa di-antibacterial control dressing, * nangangahulugang p = <0.05, ** ay nangangahulugang p = <0.01; *** ay nangangahulugang p = <0.001; nagpapahiwatig ng p = <0.0001).
Pagkatapos ay sinuri namin ang epekto ng mga damit na pilak sa pagpapagaling ng impeksyon-independiyenteng. Ang mga hindi nahawahan na sugat na pansamantalang sugat ay ginagamot sa isang di-antimicrobial control dressing o isang pilak na damit para sa 3 araw (Larawan 6). Kabilang sa nasubok na mga damit na pilak, ang mga sugat lamang na ginagamot sa oxygenated na sarsa ng asin ay lumitaw na mas maliit sa mga imahe ng macroscopic kaysa sa mga sugat na ginagamot sa control (Larawan 6A-D). Ang dami ng lugar ng sugat gamit ang pagsusuri sa histological ay nagpakita na ang average na lugar ng sugat pagkatapos ng paggamot sa AG oxysols dressing ay 2.35 mm2 kumpara sa 2.96 mm2 para sa mga sugat na ginagamot sa control group, ngunit ang pagkakaiba na ito ay hindi umabot sa istatistikong kabuluhan (p = 0.488) (Fig . Sa kaibahan, walang pagbawas sa lugar ng sugat na sinusunod pagkatapos ng paggamot sa AG1+ (3.38 mm2, p = 0.757) o AG1++ EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) na damit kumpara sa control group. Ang pagtaas ng pagbabagong -buhay ng epithelial ay sinusunod sa pagbibihis ng Ag oxysol kumpara sa control group (30% kumpara sa 22%, ayon sa pagkakabanggit), bagaman hindi ito umabot sa kabuluhan (p = 0.067), ito ay lubos na makabuluhan at kinukumpirma ang mga nakaraang resulta. Ang isang dressing na may oxysol ay nagtataguyod ng muling epithelialization. -Epithelization ng mga hindi na -impeksyon na sugat17. Sa kaibahan, ang paggamot sa AG1+ o AG1++ EDTA/BC dressings ay walang epekto o nagpakita ng nabawasan na muling epithelialization kumpara sa kontrol.
Epekto ng pilak na sugat na nagbibihis sa pagpapagaling ng sugat sa mga hindi na -impeksyon na mga daga na may kumpletong resection. . (EH) Ang mga seksyon ng kinatawan ng sugat na may seksyon na may hematoxylin at eosin. Ang dami ng lugar ng sugat (I) at porsyento ng reepithelialization (J) ay kinakalkula mula sa mga seksyon ng histological sa kalagitnaan ng sugat gamit ang software ng pagsusuri ng imahe (n = 11–12 bawat pangkat ng paggamot). Ang mga graph ay nagpapakita ng ibig sabihin +/- standard error. * nangangahulugang p = <0.05.
Ang pilak ay may mahabang kasaysayan ng paggamit bilang isang antimicrobial therapy sa pagpapagaling ng sugat, ngunit ang maraming iba't ibang mga formulations at mga pamamaraan ng paghahatid ay maaaring magresulta sa mga pagkakaiba -iba sa antimicrobial efficacy 18. Bukod dito, ang mga katangian ng antibiofilm ng mga tiyak na sistema ng paghahatid ng pilak ay hindi lubos na nauunawaan. Bagaman ang tugon ng immune ng host ay medyo epektibo laban sa bakterya ng planktonic, sa pangkalahatan ay hindi gaanong epektibo laban sa biofilms19. Ang mga bakterya ng planktonic ay kaagad na phagocytosed ng macrophage, ngunit sa loob ng mga biofilms, ang mga pinagsama -samang mga cell ay nagdudulot ng karagdagang mga problema sa pamamagitan ng paglilimita sa tugon ng host sa lawak na ang mga immune cells ay maaaring sumailalim sa apoptosis at ilabas ang mga proinflamatikong kadahilanan upang mapahusay ang immune response20. Napansin na ang ilang mga leukocytes ay maaaring tumagos sa biofilms21 ngunit hindi magagawang phagocytose bacteria sa sandaling ang pagtatanggol na ito ay nakompromiso22. Ang isang holistic na diskarte ay dapat gamitin upang suportahan ang host immune response laban sa impeksyon sa biofilm ng sugat. Ang pagkubkob ng sugat ay maaaring pisikal na makagambala sa biofilm at alisin ang karamihan sa bioburden, ngunit ang tugon ng immune ng host ay maaaring hindi epektibo laban sa natitirang biofilm, lalo na kung ang host immune response ay nakompromiso. Kaya, ang mga antimicrobial therapy tulad ng mga pilak na damit ay maaaring suportahan ang tugon ng immune immune at alisin ang mga impeksyon sa biofilm. Ang komposisyon, konsentrasyon, solubility, at paghahatid ng substrate ay maaaring maimpluwensyahan ang pagiging epektibo ng antimicrobial ng pilak. Sa mga nagdaang taon, ang mga pagsulong sa teknolohiya ng pagproseso ng pilak ay naging mas epektibo ang mga damit na ito. Tulad ng pagsulong ng teknolohiya ng pilak na pilak, mahalagang maunawaan ang pagiging epektibo ng mga damit na ito sa pagkontrol sa impeksyon sa sugat at, mas mahalaga, ang epekto ng mga makapangyarihang anyo ng pilak sa kapaligiran ng sugat at pagpapagaling.
Sa pag -aaral na ito, inihambing namin ang pagiging epektibo ng dalawang advanced na pilak na damit na may maginoo na mga damit na pilak na gumagawa ng mga Ag1+ ion laban sa mga biofilms gamit ang iba't ibang mga vitro at vivo models. Sinuri din namin ang epekto ng mga damit na ito sa kapaligiran ng sugat at pagpapagaling-independiyenteng pagpapagaling. Upang mabawasan ang impluwensya ng matrix ng paghahatid, ang lahat ng mga damit na pilak na nasubok ay binubuo ng carboxymethylcellulose.
Our preliminary evaluation of these silver dressings against colonial biofilms of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus shows that, unlike traditional Ag1+ dressings, two advanced silver dressings, Ag1+ + EDTA/BC and oxygenated Ag salts, are effective at 5. Effectively killing biofilm bacteria in within Ilang araw. Bilang karagdagan, ang mga damit na ito ay pumipigil sa muling pagbuo ng biofilm sa paulit-ulit na pagkakalantad sa mga planktonic bacteria. Ang AG1+ dressing ay naglalaman ng pilak na klorido, ang parehong pilak na tambalan at base matrix bilang AG1++ EDTA/BC, at nagkaroon ng isang limitadong epekto sa kakayahang umangkop sa bakterya sa loob ng biofilm sa parehong panahon. Ang obserbasyon na ang isang AG1++ EDTA/BC dressing ay mas epektibo laban sa biofilm kaysa sa isang AG1+ dressing na binubuo ng parehong matrix at isang pilak na tambalan ay sumusuporta sa paniwala na ang mga karagdagang sangkap ay kinakailangan upang madagdagan ang pagiging epektibo ng pilak na klorido laban sa biofilm, tulad ng iniulat Saanman15. Ang mga resulta na ito ay sumusuporta sa ideya na ang BC at EDTA ay naglalaro ng isang karagdagang papel na nag -aambag sa pangkalahatang pagiging epektibo ng pagbibihis at na ang kawalan ng sangkap na ito sa AG1+ dressings ay maaaring nag -ambag sa kabiguan na ipakita sa pagiging epektibo ng vitro. Natagpuan namin na ang oxygenated AG salt dressings na gumagawa ng Ag2+ at AG3+ ion ay nagpakita ng mas malakas na pagiging epektibo ng antibacterial kaysa sa AG1+ at sa mga antas na katulad ng AG1++ EDTA/BC. Gayunpaman, dahil sa mataas na potensyal na redox, hindi malinaw kung gaano katagal ang mga ion ng Ag3+ ay nananatiling aktibo at epektibo laban sa mga biofilms ng sugat at samakatuwid ay nagkakahalaga ng karagdagang pag -aaral. Bilang karagdagan, maraming iba't ibang mga damit na bumubuo ng mga Ag1+ ion na hindi nasubok sa pag -aaral na ito. Ang mga damit na ito ay binubuo ng iba't ibang mga compound ng pilak, konsentrasyon, at mga base matrices, na maaaring makaimpluwensya sa paghahatid ng mga Ag1+ ion at ang kanilang pagiging epektibo laban sa mga biofilms. Kapansin -pansin din na maraming iba't ibang mga vitro at vivo models na ginamit upang suriin ang pagiging epektibo ng mga sugat na dressing laban sa mga biofilms. Ang uri ng modelo na ginamit, pati na rin ang nilalaman ng asin at protina ng media na ginamit sa mga modelong ito, ay maimpluwensyahan ang pagiging epektibo ng damit. Sa aming modelo ng vivo, pinayagan namin ang biofilm na tumanda sa vitro at pagkatapos ay inilipat ito sa dermal na ibabaw ng sugat. Ang tugon ng immune ng host ng host ay medyo epektibo laban sa bakterya ng planktonic na inilalapat sa sugat, sa gayon ay bumubuo ng isang biofilm habang nagpapagaling ang sugat. Ang pagdaragdag ng mature biofilm sa isang sugat ay naglilimita sa pagiging epektibo ng host immune response sa pagbuo ng biofilm sa pamamagitan ng pagpapahintulot sa mature biofilm na maitaguyod ang sarili sa loob ng sugat bago magsimula ang paggaling. Kaya, pinapayagan kami ng aming modelo na suriin ang pagiging epektibo ng mga antimicrobial dressings sa mga mature biofilms bago magsimulang gumaling ang mga sugat.
Natagpuan din namin na ang dressing fit ay naiimpluwensyahan ang pagiging epektibo ng mga pilak na damit sa mga vitro-grown biofilms at porcine na balat. Ang malapit na pakikipag -ugnay sa sugat ay itinuturing na kritikal para sa pagiging epektibo ng antimicrobial ng dressing24,25. Ang mga damit na naglalaman ng oxygenated Ag salts ay malapit na makipag -ugnay sa mga mature biofilms, na nagreresulta sa isang makabuluhang pagbawas sa bilang ng mga mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm pagkatapos ng 24 na oras. Sa kaibahan, kapag ginagamot sa AG1+ at AG1++ EDTA/BC dressings, ang mga makabuluhang bilang ng mga mabubuhay na bakterya ay nanatili. Ang mga damit na ito ay naglalaman ng mga suture sa buong haba ng sarsa, na lumilikha ng mga patay na puwang na pumipigil sa malapit na pakikipag -ugnay sa biofilm. Sa aming mga pag-aaral sa vitro, ang mga hindi contact na lugar na ito ay pumipigil sa pagpatay sa mabubuhay na bakterya sa loob ng biofilm. Sinuri namin ang kakayahang umangkop sa bakterya pagkatapos lamang ng 24 na oras ng paggamot; Sa paglipas ng panahon, habang ang pagbibihis ay nagiging mas puspos, maaaring may mas kaunting patay na espasyo, binabawasan ang lugar para sa mga mabubuhay na bakterya na ito. Gayunpaman, binibigyang diin nito ang kahalagahan ng komposisyon ng sarsa, hindi lamang ang uri ng pilak sa sarsa.
Habang ang mga pag -aaral sa vitro ay kapaki -pakinabang para sa paghahambing ng pagiging epektibo ng iba't ibang mga teknolohiya ng pilak, mahalaga din na maunawaan ang mga epekto ng mga damit na ito sa mga biofilms sa vivo, kung saan ang mga host tissue at immune response ay nag -aambag sa pagiging epektibo ng mga damit laban sa mga biofilms. Ang epekto ng mga damit na ito sa mga biofilms ng sugat ay sinusunod gamit ang pag -scan ng elektron mikroskopya at paglamlam ng EPS ng biofilm gamit ang intracellular at extracellular DNA dyes. Natagpuan namin na pagkatapos ng 3 araw na paggamot, ang lahat ng mga damit ay epektibo sa pagbabawas ng cell-free DNA sa mga sugat na nahawaan ng biofilm, ngunit ang pagbibihis ng AG1+ ay hindi gaanong epektibo sa mga sugat na nahawaan ng Staphylococcus aureus. Ang pag -scan ng mikroskopya ng elektron ay nagpakita din na ang makabuluhang mas kaunting bakterya ay naroroon sa mga sugat na ginagamot sa mga pilak na damit, bagaman ito ay mas binibigkas kasama ang oxygenated AG salt dressing at ang AG1++ EDTA/BC dressing kumpara sa AG1+ dressing. Ang mga datos na ito ay nagpapakita na ang mga damit na pang -pilak na nasubok ay may iba't ibang antas ng epekto sa istraktura ng biofilm, ngunit wala sa mga damit na pilak ang nagawang puksain ang biofilm, na sumusuporta sa pangangailangan para sa isang holistic na diskarte sa paggamot ng mga impeksyon sa sugat na biofilm; Paggamit ng mga pilak na armband. Ang paggamot ay nauna sa pamamagitan ng pisikal na labi upang alisin ang karamihan sa biofilm.
Ang mga talamak na sugat ay madalas sa isang estado ng malubhang pamamaga, na may labis na nagpapaalab na mga cell na natitira sa tisyu ng sugat para sa isang pinalawig na panahon, na nagiging sanhi ng pagkasira ng tisyu at pag -ubos ng oxygen na kinakailangan para sa mahusay na metabolismo ng cellular at pag -andar sa sugat26. Ang mga biofilms ay nagpapalala sa kapaligiran ng sugat na ito sa pamamagitan ng negatibong nakakaapekto sa pagpapagaling sa iba't ibang mga paraan, kabilang ang pagsugpo sa paglaganap ng cell at paglipat at pag -activate ng mga proinflamatikong cytokines27. Habang ang mga damit na pilak ay nagiging mas epektibo, mahalagang maunawaan ang epekto nila sa kapaligiran ng sugat at pagpapagaling.
Kapansin-pansin, kahit na ang lahat ng mga damit na pilak ay nakakaapekto sa komposisyon ng biofilm, tanging ang mga oxygenated na pilak na asin na dressings ay nadagdagan muli ang muling pagpapalabas ng mga nahawaang sugat na ito. Sinusuportahan ng mga datos na ito ang aming nakaraang mga natuklasan17 at ng mga Kalan et al. .
Ang aming kasalukuyang pag-aaral ay nagtatampok ng mga pagkakaiba-iba sa teknolohiya ng pilak sa pagitan ng antimicrobial na mga damit na pilak at ang epekto ng teknolohiyang ito sa kapaligiran ng sugat at nakapagpapagaling na impeksyon. Gayunpaman, ang mga resulta na ito ay naiiba sa mga nakaraang pag -aaral na nagpapakita na ang AG1 + + EDTA/BC dressing ay pinabuting mga parameter ng pagpapagaling ng mga nasugatan na tainga ng kuneho sa vivo. Gayunpaman, maaaring ito ay dahil sa mga pagkakaiba -iba sa mga modelo ng hayop, oras ng pagsukat, at mga pamamaraan ng aplikasyon ng bakterya29. Sa kasong ito, ang mga pagsukat ng sugat ay kinuha 12 araw pagkatapos ng pinsala upang payagan ang mga aktibong sangkap ng sarsa upang kumilos sa biofilm sa mas mahabang panahon. Sinusuportahan ito ng isang pag -aaral na nagpakita na ang mga klinikal na nahawaang leg ulcers ay ginagamot sa AG1 + + EDTA/BC sa una ay nadagdagan ang laki pagkatapos ng isang linggo ng paggamot, at pagkatapos ay sa susunod na 3 linggo ng paggamot na may AG1 + + EDTA/BC at sa loob ng 4 na linggo ng Paggamit ng mga di-antimicrobial. gamot. Ang mga damit na CMC upang mabawasan ang laki ng Ulcers30.
Ang ilang mga form at konsentrasyon ng pilak ay ipinakita na maging cytotoxic sa vitro 11, ngunit ang mga resulta ng vitro ay hindi palaging isinasalin sa masamang epekto sa vivo. Bilang karagdagan, ang mga pagsulong sa teknolohiya ng pilak at isang mas mahusay na pag -unawa sa mga pilak na compound at konsentrasyon sa mga damit ay humantong sa pag -unlad ng maraming ligtas at epektibong damit na pilak. Gayunpaman, habang sumusulong ang teknolohiya ng pilak na pilak, mahalagang maunawaan ang epekto ng mga damit na ito sa kapaligiran ng sugat31,32,33. Nauna nang naiulat na ang pagtaas ng rate ng muling epithelialization ay tumutugma sa isang pagtaas ng proporsyon ng anti-namumula na M2 macrophage kumpara sa pro-namumula na M1 phenotype. Ito ay nabanggit sa isang nakaraang modelo ng mouse kung saan ang mga pilak na hydrogel sugat na dressings ay inihambing sa pilak na sulfadiazine at non-antimicrobial hydrogels34.
Ang mga talamak na sugat ay maaaring magpakita ng labis na pamamaga at napansin na ang pagkakaroon ng labis na neutrophil ay maaaring makapinsala sa pagpapagaling ng sugat35. Sa isang pag-aaral sa mga daga na na-neutrophil, ang pagkakaroon ng mga neutrophil ay naantala ang reepithelialization. Ang pagkakaroon ng labis na neutrophils ay humahantong sa mataas na antas ng mga proteases at reaktibo na species ng oxygen, tulad ng superoxide at hydrogen peroxide, na nauugnay sa talamak at mabagal na pagpapagaling na sugat37,38. Gayundin, ang isang pagtaas sa mga numero ng macrophage, kung hindi makontrol, ay maaaring humantong sa pagkaantala ng pagpapagaling ng sugat39. Ang pagtaas na ito ay partikular na mahalaga kung ang macrophage ay hindi magagawang lumipat mula sa isang pro-namumula na phenotype sa isang pro-nakapagpapagaling na phenotype, na nagreresulta sa mga sugat na hindi pagtupad sa nagpapaalab na yugto ng pagpapagaling40. Napansin namin ang pagbawas sa mga neutrophil at macrophage sa mga sugat na nahawaan ng biofilm pagkatapos ng 3 araw na paggamot sa lahat ng mga damit na pilak, ngunit ang pagbaba ay mas binibigkas na may mga oxygenated na damit na pang-asin. Ang pagbaba na ito ay maaaring isang direktang resulta ng tugon ng immune sa pilak, isang tugon sa nabawasan na bioburden, o ang sugat na nasa ibang yugto ng pagpapagaling at samakatuwid ang mga immune cells sa sugat ay nabawasan. Ang pagbabawas ng bilang ng mga nagpapaalab na mga cell sa sugat ay maaaring mapanatili ang isang kapaligiran na naaayon sa pagpapagaling ng sugat. Ang mekanismo ng pagkilos ng kung paano ang mga oxysalts ng AG ay nagtataguyod ng impeksyon-independiyenteng pagpapagaling ay hindi malinaw, ngunit ang kakayahan ng AG oxysalts na makagawa ng oxygen at sirain ang mga nakakapinsalang antas ng hydrogen peroxide, isang tagapamagitan ng pamamaga, ay maaaring ipaliwanag ito at nangangailangan ng karagdagang pag-aaral17.
Ang talamak na hindi nakapagpapagaling na sugat ay nagdudulot ng problema para sa parehong mga doktor at pasyente. Bagaman maraming mga damit ang nag -aangkin ng pagiging epektibo ng antimicrobial, bihirang nakatuon ang pananaliksik sa iba pang mga pangunahing kadahilanan na nakakaimpluwensya sa sugat na microenvironment. Ipinapakita ng pag -aaral na ito na ang iba't ibang mga teknolohiya ng pilak ay may iba't ibang pagiging epektibo ng antimicrobial at, mahalaga, iba't ibang mga epekto sa kapaligiran ng sugat at pagpapagaling, na independiyenteng impeksyon. Bagaman ang mga ito sa vitro at sa mga pag -aaral ng vivo ay nagpapakita ng pagiging epektibo ng mga damit na ito sa pagpapagamot ng mga impeksyon sa sugat at pagtataguyod ng pagpapagaling, ang mga randomized na kinokontrol na pagsubok ay kinakailangan upang masuri ang pagiging epektibo ng mga damit na ito sa klinika.
Ang mga datasets na ginamit at/o nasuri sa panahon ng kasalukuyang pag -aaral ay magagamit mula sa kaukulang may -akda sa makatuwirang kahilingan.
Oras ng Mag-post: Jul-15-2024